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HJ 347.1-2018 水质 粪大肠菌群的测定 滤膜法简介：
HJ 347.1-2018 是中国环境保护标准中的一项规定，标题为《水质 粪大肠菌群的测定 滤膜法》。这项标准主要用于检测水样中的粪大肠菌群，这是评估水体受粪便污染程度的重要指标，特别是对于饮用水源和游泳池等水环境的质量控制。
滤膜法是一种常用的检测方法，它的基本原理是：首先，将一定量的水样通过已知孔径的滤膜，大肠菌群等微生物会被截留在滤膜上；然后，滤膜上的微生物被培养，计数和鉴定，以确定其数量，从而推算出水中的粪大肠菌群浓度。这种方法简便、快速，适用于大规模的水质监测。
在实际操作中，需要严格按照标准的操作步骤进行，包括样品采集、滤膜处理、培养和计数等步骤，确保结果的准确性和可靠性。HJ 347.1-2018标准提供了详细的实验方法和质量控制要求，以确保检测结果的科学性和有效性。
HJ 347.1-2018 水质 粪大肠菌群的测定 滤膜法部分内容预览：
水质粪大肠菌群的测定滤膜法
水质粪大肠菌群的测定滤膜
本标准规定了测定水中粪大肠菌群的滤膜法。 本标准适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水中粪大肠菌群的测定。 本方法的检出限：当接种量为100ml时，检出限为10CFU/L；当接种量为500ml时DBJ∕T 13-262-2017 福建省里氏硬度法现场检测建筑钢结构钢材抗拉强度技术规程， 检出限为2CFU/L
本标准引用了下列文件或其 期的引用文件，其有效版本适用于本 标准。 GB/T14581水质湖泊和水库采样技术指导 HJ494水质采样技术指导 HI/T91地表水和污水监测技术规范
样品通过孔径为0.45um的滤膜过滤，细菌被截留在滤膜上，然后将滤膜置于MFC选 择性培养基上，在特定的温度（44.5℃）下培养24h，胆盐三号可抑制革兰氏阳性菌的生长， 粪大肠菌群能生长并发酵乳糖产酸使指示剂变色，通过颜色判断是否产酸，并通过呈蓝色或 蓝绿色菌落计数，测定样品中粪大肠菌群浓度。
5.1活性氯具有氧化性，能破坏微生物细胞内的酶活性，导致细胞死亡，可在样品采集（8.1）
除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂或生物试剂，实验用水为蒸馏 水或去离子水。
7.1采样瓶：1L、500ml或250ml带螺旋帽或磨口塞的广口玻璃瓶。
采样后应在2h内检测，否则，应10℃以下冷藏但不得超过6h。实验室接样后，不能 立即开展检测的，将样品在4℃以下冷藏并在2h内检测
先估计出适合在滤膜上计数所使用的体积，然后再取这个体积的1/10和10倍，分别过滤。理 想的样品接种量是滤膜上生长的粪大肠菌群菌落数为20～60个，总菌落数不得超过200个。 当最小过滤体积为10ml，滤膜上菌落密度仍过大时，则应对样品进行稀释。1:10稀释的方法 为：吸取10ml样品，注入盛有90ml无菌水（6.3）的三角烧瓶中，混匀，制成1:10稀释样品。 样品接种量参考表见表1。
表 1 接种量参考表
用灭菌镊子以无菌操作夹取无菌滤膜（6.2）贴放在已灭菌的过滤装置（7.4）上，固定 好过滤装置，将样品充分混匀后抽滤，以无菌水（6.3）冲洗器壁2～3次。样品过滤完成后， 再抽气约5S，关上开关。
用灭菌镊子夹取滤膜移放在MFC培养基（6.1）上，滤膜截留细菌面向上，滤膜应与培 养基完全贴紧，两者间不得留有气泡，然后将培养皿倒置，放入恒温培养箱内，44.5℃土0.5℃ 培养24h±2h。
9. 3. 1空白对照
9.3.2阳性及阴性对照
要用无菌水（63）按照步骤9.1和9.2进行实验室
将粪大肠菌群的阳性菌株（如大肠埃希氏菌Escherichiacoli）和阴性菌株（如产气肠杆 菌Enterobacteraerogenes）制成浓度为40～600CFU/L的菌悬液，分别按照9.1～9.2步骤培养， 阳性菌株应呈现阳性反应，阴性菌株应呈现阴性反应，否则，该次样品测定结果无效，应查 明原因后重新测定。
MFC培养基上呈蓝色或蓝绿色的菌落为粪大肠菌群菌落，予以计数。 MFC培养基上呈灰色、淡黄色或无色的菌落为非粪大肠菌群菌落，不予计数。 结果判读参考图片见图1。
中的粪大肠菌群数（CFU/L），按照公式（1）进
阴性菌落（箭头指示处）
图1结果判读参考图片
式中：C一 一样品中粪大肠菌群数，CFU/L； CI一滤膜上生长的粪大肠菌群菌落总数，个： 1000一将过滤体积的单位由ml转换为L； f一样品接种量，ml； 注：若平行样结果都在20～60CFUL范围内，最终结果取平均值以几何平均计算。
测定结果保留至整数位，最多保留两位有效数字，当测定结果≥100CFU/L时，以科学 计数法表示。粪大肠菌群检验记录及报告格式参见附录A。
6个实验室对低浓度（地下水，浓度均值为2.0X102CFU/L）、中浓度（地表水，浓度 均值为1.6×105CFU/L）和高浓度（生活污水，浓度均值为1.6×107CFU/L）三个不同浓度 粪大肠菌群的实际样品和有证标准样品（浓度为3670MPN/L，可接受范围为330~ 7710MPN/L）进行了6次重复测定：实验室内相对标准偏差范围分别为5.3%～12%、0.81%~ 2.1%、0.51%~4.2%和7.7%~9.8%；实验室间相对标准偏差分别为6.8%、3.9%、4.0%和3.6%； 实验室间95%置信区间见表2。
表2实验室间95%置信区间
12质量保证和质量控制
更换不同批次培养基时要进行阳性和阴性菌株检验，将粪大肠菌群测定的阳性菌株（如 大肠埃希氏菌Escherichiacoli）和阴性菌株（如产气肠杆菌Enterobacteraerogenes）配成适 宜浓度，按样品过滤（9.1）的要求使滤膜上生长的菌落数为20～60个，然后按培养（9.2）
的要求进行操作，阳性菌株应生长为蓝色或蓝绿色菌落，阴性菌株应生长为灰色、淡黄色、 无色或无菌落生长。否则，该次样品测定结果无效，应查明原因后重新测定。
12.2. 1空白对照
每次试验都要用无菌水做实验室空白测定（93.1)，培养后的培养基上不得有任何菌落 生长。否则，该次样品测定结果无效，应查明原因后重新测定
12.2. 2阳性及阴性对照
定期按照93.2进行阳性及阴性对照试验，阳性菌株应呈现阳性反应，阴性菌株应呈现 阴性反应，否则，该次样品测定结果无效，应查明原因后重新测定。
使用后的废物及器皿须经121℃高压蒸汽灭菌30min或使用液体消毒剂（自制或市售） 灭菌后，器血方可清洗，废物作为一般废物处置。
当样品浑浊度较高时GB 50435-2007 平板玻璃工厂设计规范，应选用其他方法。
附录A （资料性附录） 粪大肠菌群检验记录及报告格式
表A.1粪大肠菌群测定检验记录
检验者：校对：审核：
注：可根据实际工作需要自行设计表格，至少要包括上述信息。
《电气∕电子∕可编程电子安全相关系统的功能安全 第7部分：技术和措施概述 GB∕T 20438.7-2017》表A.2粪大肠菌群测定数据报告格式
注：可根据实际工作需要自行设计表格，至少要包括上述信息。
：可根据实际工作需要自行设计表格，至少要包括上述