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GB／T 41407-2022 微流控芯片核酸恒温扩增仪技术要求.pdf简介：

GB/T 41407-2022是一个由中国国家标准管理机构发布的技术标准，全称为《微流控芯片核酸恒温扩增仪技术要求》。这个标准主要针对的是使用微流控技术的芯片式核酸恒温扩增仪，这是一种用于生物学实验，特别是基因测序和PCR（聚合酶链反应）的设备。

该技术要求详细规定了这类设备的设计、性能、功能、安全性、精度、可靠性以及操作流程等方面的标准。它涵盖了设备的温度控制、反应液的精确控制、芯片设计、数据处理能力、样本处理能力、结果显示等方面的要求，确保了微流控芯片核酸扩增仪的性能稳定，结果准确，操作便捷，适用于医疗、科研、生物技术等领域。

总的来说，GB/T 41407-2022为微流控芯片核酸恒温扩增仪的生产和使用提供了一个统一的技术规范，有助于提升产品的质量，保障实验的可靠性，推动微流控技术在生物医学领域的广泛应用。

GB／T 41407-2022 微流控芯片核酸恒温扩增仪技术要求.pdf部分内容预览：

YY/T1173界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 核酸恒温扩增nucleicacidisothermalamplification 由常温升温至一固定的扩增高温后，在该固定温度下进行核酸（包括DNA和RNA)体外快速复制 放大的过程。 注：因使用的聚合酶和引物的不同，扩增高温的温度值存在一定的差异，需要根据实际试验条件进行优化。 3.2 核酸恒温扩增仪 nucleic acid isothermal amplification analyzer 具有恒定温度控制的功能，借助一固定的扩增高温进行核酸序列的特异性扩增，通过光学系统接收

GB/T 414072022

扩增仪可根据控温方式、载体、载体运动状态、荧光通道和体积等不同的方面分类，具体如下： 根据控温方式可分为空气浴加热扩增仪、水浴加热扩增仪、金属或陶瓷接触加热扩增仪。 根据样品载体可分为离心管式扩增仪、孔板式扩增仪和微流控芯片扩增仪。 根据样品载体运动状态可分为静态扩增仪和旋转扫描式扩增仪。 根据采用荧光通道的多少可分为单通道荧光扩增仪和多通道荧光扩增仪。 根据体积可分为台式扩增仪、便携式扩增仪和工作站型扩增仪。

2015年二级建造师《建筑工程管理与实务》冲刺班讲义（173页知名网校）软件安装光盘 扩增仪主机主要由控制系统、电源系统、温控系统、检测系统和外壳部件组成

扩增仪可根据分类不同命名为核酸恒温扩增实时荧光检测系统、核酸恒温扩增分析仪、恒温扩增分 析仪等，其中“恒温”也可用“等温”替代。命名还可增加载体内容，如微流控芯片核酸恒温扩增分析仪、 管式核酸恒温扩增分析仪、孔板式核酸恒温扩增分析仪

5.1.1平均升温速率

仪器从37℃升温至65℃过程中，平均升温速率不应小于10.0℃/

5.1.2平均降温速率

恒温计时开始10s内到计时结束之间温度测量数据的平均值与模块设置温度差值的绝对值，不应 大于0.5℃。

5.1.5温度持续时间准确度

设定恒温的时间与温度测量

温度有效使用区不同位置之间温度测量数据大值减小值的差值不应大于1.0℃。

5.2.1光强度检测重复性

对激发光激发标准荧光（或浊度)物质的同一份样本进行连续重复检测，荧光（或浊度引起的光强变 化）信号测量值的变异系数（CoefficientofVariation，CV)不应大于5%

注：如标准荧光料FAM溶液

5.2.2光强度检测精密度

对同一种激发光激发标准荧光（或浊度)物质相同质量或体积的多份样本进行连续重复检测，荧光 (或浊度引起的光强变化）信号测量值的变异系数CV不应大于15%。 注：如标准荧光染料FAM溶液。

.2.3光强度检测线性度

对系列标准荧光（或浊度）物质的浓度梯度样本进行检测，计算各浓度荧光信号（或浊度引起的光强 变化)测定值与稀释浓度比例的线性回归系数r1，不应低于0.990。 注：如标准荧光染料FAM溶液，稀释成5个梯度，如10μmol/L、5μmol/L、2.5μmol/L、1.25μmol/L和 0.625umol/L

5.3.1样本检测重复性

对标准核酸样本高中低浓度样本进行等温扩增检测，相同浓度检测的指数级扩增拐点时间的变异 系数CV，不应大于10%， 注：如金黄色酿脓葡葡球菌（Staphylococcusaureus，Sau）或结核分枝杆菌（MycobacteriumTuberculosis，Mtb）的核 酸样本的10°copies/uL,10*copies/μL、10°copies/μL

5.3.2样本检测线性度

对标准核酸样本稀释的系列梯度浓度样本进行扩增检测，各浓度的指数级扩增拐点时间与浓度对 数值的线性回归系数r2，不应低于0.980。 注：如Sau或Mtb的核酸样本的5个梯度10°copies/μL、105copies/μL、10*copies/μL、103copies/μL 10"copies/μL.

对标准核酸样本稀释的系列梯度浓度样本进行扩增检测，各浓度的指数级扩增拐点时间与浓度对 数值的线性回归系数T2，不应低于0.980。 注：如Sau或Mtb的核酸样本的5个梯度10°copies/μL、105copies/μL、10*copies/μL、103copies/μL 10"copies/μL.

.4核酸扩增检测灵敏质

5.5不同通道荧光干扰

过于多色荧光标记测量，其他通道荧光检测强度，不应高于目标通道荧光阈

外观应满足以下要求： a）面板上的图形符号和文字准确、清晰、均匀、无划痕； b）紧固件连接牢固可靠，无松动； ）运动部件平稳，无卡住、突跳及显著空转，摩擦阻力均匀，键组回调灵活。

电气安全应符合GB4793.1和YY0648的规定。 加热装置的电气安全应符合GB4793.6的规定。 设备安装、操作和维护中的电气安全还应符合GB4793.9的规定。

应符合GB/T14710中机械I组和环境I组的要求

5.10多加热模块多加热通道设备

个加热模块和加热通道均应满足5.1~5.9的要

6.1.1额定电源：220V±22V,50Hz士1Hz。 6.1.2环境温度：15℃30℃。 6.1.3 相对湿度：20%~85%。 6.1.4 大气压力：85.0kPa106.0kPa。 6.1.5扩增仪开机后预热时间不少于10min。 6.1.6扩增仪使用前应按照仪器生产厂家的说明书操作或校准。 6.1.7扩增仪测量时采用标准荧光物质材料和标准核酸样本或标准核酸试剂盒。 6.1.8扩增仪测温工具的精度不低于0.01℃，并且在校验的有效期内。 6.1.9 9温度控制测试标定方法采用水浴或其他方法作为恒温单元，用设备内部温度控制器和标准温度 测量指示表同时测量温度，各连续记录5次取平均值，比较二者的温度测量数据，评价温度测量的准 确度

1.10正常工作温度控制流程通过软件设置

6.1.10正常工作温度控制流程通过软件设置：

第1步，从常温（15℃～30℃）升温至37℃，时间3min； 第2步，从37℃升温至65℃，保持65℃恒温，时间45min，其中从37℃到65℃的升温时间 不大于3min； 第3步，从65℃降温到37℃以下，降温时间不大于5min。 使用专用软件或测温工具获得动态测量腔体加热或冷却的温度变化实时测量读数值，用计算机时 钟（或秒表）计时。 注1：6.1.1～6.1.10中的要求与生产企业标称的产品规格不一致时，以产品规格为准。 注2：标准核酸样本如Sau或Mtb。

6.2.1平均升温速率

从温度控制流程中，获取从37℃到65℃升温过程的温度实时测量数据，恒温37.0℃士0.5℃最后 个温度点，温度记为TA，恒温65.0℃士0.5℃的第二个温度点，温度记为TB，从TA到达TB的时间 记为t1，按照公式(1)计算平均升温速率VTup。连续记录3次取平均值，检查结果是否符合5.1.1的 规定。

GB/T 414072022

式中： VTup 从37℃到65℃的平均升温速率； TA 温度控制流程中，恒温37.0℃士0.5℃最后一个温度点； TB 温度控制流程中，恒温65.0℃士0.5℃的第二个温度点； 从 TA到达 Ta的时间

6.2.2平均降温速率

从温度控制流程中，获取从65℃到37℃降温过程的温度实时测量数据，恒温65.0℃士0.5℃最后 个温度点，温度记为Tc，恒温37.0℃士0.5℃的第一个温度点，温度记为Tp，从Tc到达Tp的时间 记为t2，按照公式（2)计算平均降温速率Vtdow。连续记录3次取平均值，检查结果是否符合5.1.2的 规定。

接6.1.10第2步操作，从37℃升温到65℃，当温度达到恒温65.0℃土0.5℃第10s开始记录温度 实时测量数据，连续记录30次，每次记录的时间间隔不大于0.1s，从该数据找出温度的最高值Tx和 最低值Tmin，按照公式（3)计算控温精度偏差△T1，连续实验5次取最大值，检查结果是否符合5.1.3的 规定，

△T——恒温65.0℃土0.5℃控温精度偏差 Tmax 恒温65.0℃士0.5℃温度最高值；

在20℃～80℃范围内改变设置温度，设量 第10s开始记录扩增仪温度控制器的实际测量温度T，每次记录的时间间隔不大于0.1S，每个 连续测量记录30次取平均值T平均，与模块设置温度T设置比较，按照公式（4)计算温度偏差的绝 T，,检查结果是否符合5.1.4的规定

△T2—与模块设置温度相比温度偏差的绝对值； T平均—每个温度点连续测量记录30次取温度平均值； 工模块设置温度值。

6.2.5温度持续时间准确度

计时GB 51214-2017 煤炭工业露天矿边坡工程监测规范，每隔30s记录一次温度实时测量数据T；，直到恒温扩增阶段结束后停止计时，观测实际测

GB/T 414072022

温度T，在65℃士0.5℃的持续时间t，按照公式（5)计算与设定时间t。的相对偏差△t。检查结果是否 符合5.1.5的规定

在65℃恒温扩增阶段，从恒温扩增腔体的温度有效使用区中选择2个（或以上）不同位置的测温 点，用校正的温度测量传感器对这些测温点进行实时温度测量，获得温度测量值，计算不同位置之间温 度测量数据的差值，检查结果是否符合5.1.6的规定。 注：样品载体采用旋转扫描工作方式的扩增仪免检，前提是其工作方式能有效保证样品载体不同位置的温度均 匀性。

注册安全工程师考试复习资料(2011年)6.3.1光强度检测重复性

在常温条件下，用激发光对标准荧光（或浊度）物质材料的3个浓度进行检测，检测时间10min，使 用离心管载体每种浓度配制相同的样本量m（m≥5），每一份各重复测量10次记录荧光（或浊度）信号 测量数据I；，或选择微流控芯片上相同的独立通道样本量m（m≥5)连续重复测量，每个通道选择最后 的10次连续重复记录的荧光（或浊度)信号测量数据I：，分别计算每份样本或每个通道的平均值I平均 和标准差SD，然后按照公式(6)计算得到荧光(或浊度)信号测量值的变异系数CV，检查结果是否符合 5.2.1的规定。