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污水及污泥中蛔虫卵的检测方法.pdf简介:
检测污水和污泥中的蛔虫卵是一项重要的环境卫生监测任务,因为这些卵可能代表水源或土壤受到人畜粪便污染,暗示存在寄生虫病的潜在风险。以下是几种常用的检测方法:
1. 直接观察法:这是最基础的方法,通过显微镜直接观察污水或污泥样本中的卵。但这种方法的准确性和可靠性较低,因为它可能漏检部分卵或受到外部因素的干扰。
2. 沉淀法:将污水样品通过沉淀或离心,然后取上清液观察。常用的有改良加藤沉淀法,将样品与硫酸镁溶液混合,使卵沉淀,然后在显微镜下观察。
3. ELISA(酶联免疫吸附试验):这是一种敏感度高的方法,适用于大规模检测。通过特定的抗体-抗原反应,检测是否存在蛔虫卵的抗原。
4. PCR(聚合酶链反应):这是一种分子生物学方法,通过扩增蛔虫卵核酸,能够快速、准确地检测出样本中的虫卵。
5. 混合样检测:对于大量污水或污泥,可以采用混合样检测,先进行预处理,然后取样进行检测,以提高效率和准确性。
6. 污水处理厂出水检测:污水处理厂在处理后的出水也需要定期检测,以确保达到排放标准。
以上方法的选择取决于具体的检测需求、样本量、实验室条件和预算。在实际操作中,可能需要结合多种方法进行,以确保结果的可靠性。
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4.1.4抽滤:将烧杯中含卵混悬液,通过漏斗,抽滤于直径35mm, 无裂纹和孔眼的微孔滤膜(2.4)上,混合悬液中的虫卵,全部阻 留在微孔滤膜上,有时由于样品中虫卵数量过多,浑浊度大, 不易为一张滤膜过滤时,则可另添一或二张滤膜,再抽滤。 4.1.5镜检:抽滤完毕,立即用弯头小镊子,将滤膜从漏斗的滤 台上小心取下,平铺于大型载物玻璃片上(2.6),趁 湿在低倍显微镜下直接检查,最好滴加两滴50%甘油溶液,这样 虫卵在比较透明而无气泡的视野中,便于观察和计数。
滤于1000ml锥形量杯中,静置半小时至一小时后,倒去上层液 体,如此,约半小时换水一次,直至上层水澄清为止。 4.2.3测定体积:用虹吸管慢慢吸去沉淀上面的液体,将沉淀物 到入刻度量筒中,测量沉淀物的容积。 4.2.4镜检:将沉淀物搅匀,迅速用1ml玻璃吸管吸取0.05和 0.1ml于载玻片,盖以盖玻片在低倍镜下检查并计算出总数。
5.1用饱和氯化钠溶液离心飘浮法时,5一20g(或ml)样品中的 虫卵,高度集中在滤膜上,在显微镜下计数时容易混乱,因此 最好能在显微镜的目镜筒内,装上一枚目镜计数网,利用移动尺 有规律的移动,逐渐数完整个滤膜上的全部虫卵数。 5.2在用水洗沉淀法时,需要准确测定沉淀物的容积,在用玻璃 吸管吸取沉淀以供镜检时,必须搅拌均匀而后取样,而且需要观 察若干次,而后取其平均数,从而计算1ml沉淀物的虫卵数,最 后乘以沉淀总容积数,即是100g(或100m)原始样品的虫卵数
5.1直接镜检法:是根据虫卵在发育过程中所出现的各种形 态,以鉴别其死活。首先是鉴别受精卵和未受精卵,其次是鉴别 有生活力和失去生活力(变性卵)的受精卵和含有幼虫卵的形态 有关形态鉴别要点如下:
6.1.1 未受精蛔虫卵的形态:
多为椭圆形,有时呈三菱形或不规则形,大小平均为
6.1.2 受精虫卵的形态:
虫卵(变性卵)的形态,卵细胞移向一端,致使卵两端呈现有 大小不等的半月形空隙。卵内脂肪变性,形成空泡,很像未受精 卵,卵细胞颗粒减少或消失。卵细胞质浑浊,呈黑色或棕黑色。 卵细胞向不定部位呈球状收缩。卵壳的一侧或两侧,一端右两端 向内凹陷或破裂。只有蛋白质壳,而缺内容物
JGJ91-2019标准下载6.1.3 含有活幼虫卵的形态:
虫体的前后部没有颗粒,中部颗粒清晰而有金属光泽,有立体感, 镜检时,注视或轻压,可有轻微蠕动,强压后,有时可挤出幼虫
幼虫体内儿乎充满颗粒,且模糊不清,无金属光泽,缺之立体感, 镜检时注视之,久久不见蠕动,稍稍加热或轻压,不会动,强 玉时,虽能挤出幼虫,但也不改变其原来的卷曲状态。 以上所列是死活虫卵的一般形态,在镜检中有时会遇到外形发 生变化的畸形活卵和各种形态的未受精卵,其它寄生虫卵,以及 容易误认为寄生虫卵的异物
把上述通过饱和氯化钠溶液离心飘浮后(4.1)收集在滤膜上的 虫卵,经过计数后,直接用来培养测定虫卵生活力,称为培 养法。